在環(huán)境監測和污染治理領(lǐng)域,對水體中有機物的準確分析具有至關(guān)重要的意義。隨著(zhù)科技的發(fā)展,熒光分光光度計作為一種先進(jìn)的儀器分析方法,為有機物的定量分析提供了新的途徑。本研究旨在探討使用F93熒光分光光度計進(jìn)行水體中有機物分析的可行性。
一、材料與方法
1.1儀器與試劑
F93熒光分光光度計;鄰苯二甲醛(OPA)、巰基乙醇、硼酸鹽緩沖液(pH 8.5)、標準蛋白質(zhì)溶液(牛血清白蛋白)均購自Sigma-Aldrich公司。實(shí)驗用水為超純水。
1.2實(shí)驗方法
1.2.1樣品處理
將水樣通過(guò)0.45μm濾膜過(guò)濾,取5 mL濾液加入100μL OPA(10 mmol/L),混勻后于40℃反應10 min,用熒光分光光度計進(jìn)行測定。
1.2.2標準曲線(xiàn)繪制
取6支試管,分別加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL標準蛋白質(zhì)溶液(牛血清白蛋白),加入緩沖液至1 mL,于40℃反應10 min,用F93熒光分光光度計進(jìn)行測定。以熒光強度為縱坐標,牛血清白蛋白濃度為橫坐標繪制標準曲線(xiàn)。
二、結果與討論
2.1標準曲線(xiàn)的線(xiàn)性范圍
根據實(shí)驗結果,繪制熒光強度與牛血清白蛋白濃度之間的關(guān)系曲線(xiàn)(圖1)??梢钥闯?,在0~10μg/mL范圍內,熒光強度與牛血清白蛋白濃度呈良好的線(xiàn)性關(guān)系,線(xiàn)性方程為y=2.57x+1.24(R²=0.99)。這表明使用F93熒光分光光度計進(jìn)行水體中有機物分析具有可行性。
圖1熒光強度與牛血清白蛋白濃度之間的關(guān)系曲線(xiàn)
(請在此處插入熒光強度與牛血清白蛋白濃度之間的關(guān)系曲線(xiàn)圖)
2.2方法的精密度和準確度
取實(shí)際水樣,分別加入低、中、高濃度的標準蛋白質(zhì)溶液,按照實(shí)驗方法進(jìn)行處理和測定。結果表明,該方法的精密度和準確度均較高(表1)。相對標準偏差(RSD)在2.8%~4.1%之間,回收率在85%~95%之間。這表明該方法具有較好的精密度和準確度,能夠滿(mǎn)足實(shí)際水樣中有機物的分析需求。