紫外可見分光光度計(jì)的波長定位原理與實(shí)現(xiàn)

在理化分析中zui常用到的儀器就是分光光度計(jì)，這種儀器的基本原理主要是建立在與光和物質(zhì)相互作用的基礎(chǔ)上，當(dāng)某一溶液當(dāng)中其吸收的輻射的物質(zhì)分子與光子發(fā)生碰撞的時(shí)候，也就會(huì)產(chǎn)生一種吸收，對(duì)于其吸光度值的大小進(jìn)行測量可以有效的對(duì)某種物質(zhì)存在的量的多少進(jìn)行反應(yīng)。本研究基于此，主要分析紫外可見分光光度計(jì)在其使用過程中波長定位問題，希望所得的結(jié)果能夠?yàn)橄嚓P(guān)領(lǐng)域提供有價(jià)值的參考。

紫外可見分光光度計(jì)是通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度，對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的儀器。在生物制藥、精細(xì)化工、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用，并被納入《中華人民共和國強(qiáng)制檢定的工作計(jì)量器具明細(xì)目錄》，需要根據(jù)檢定規(guī)程定期檢定。文章再次探討紫外可見分光光度計(jì)的波長定位原理與實(shí)現(xiàn).

1 紫外可見分光光度計(jì)

1.1 紫外可見光光度計(jì)結(jié)構(gòu)、特點(diǎn)

紫外可見光光度計(jì)是一種常規(guī)分析儀器，充分利用紫外可見光度法原理。以光路設(shè)計(jì)為基礎(chǔ)，紫外可見分光光度計(jì)可以分為不同的類型，比如，雙波長分光光度計(jì)、單光束分光光度計(jì)。就其結(jié)構(gòu)來說，紫外可見光光度計(jì)是由多種元素組成，比如，輻射源、單色器、檢測器。比如，輻射源在應(yīng)用過程中，它必須具備特殊性質(zhì)的連續(xù)光譜，比如，較強(qiáng)的穩(wěn)定性，充足的輸出功率。比如，試樣容器。它又被叫做吸收池，主要為那些盛放試液提供條件，進(jìn)行吸光度測量。玻璃池、石英池是其核心組成元素，石英池主要用于紫外到可見區(qū)，而玻璃池只能用于可見區(qū)方面。一般來說，容器的光程需要在0.5-10cm之間。又比如，顯示裝置。顯示裝置的發(fā)展速度非?？欤渲械臒晒馄溜@示、記錄儀器等能夠把數(shù)據(jù)、圖譜等充分顯示出來。同時(shí)，紫外可見光光度計(jì)具有多樣化的特點(diǎn)。首先，它具有較高的靈敏度、較好的選擇性、使用范圍非常廣泛。

1.2 紫外可見分光光度計(jì)應(yīng)用范圍

從某個(gè)側(cè)面來說，紫外可見分光度計(jì)的應(yīng)用范圍非常廣泛，比如，定量分析、定性于結(jié)構(gòu)分析。一是：定量分析。

在定量分析方面，紫外可見光光度計(jì)主要用于各種物料中，比如，微量、超微量的準(zhǔn)確測定。二是：反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究方面。在這方面，紫外可見光光度計(jì)主要是對(duì)其中的反應(yīng)物具有的濃度進(jìn)行研究。在時(shí)間不斷變化情況下，對(duì)應(yīng)的函數(shù)關(guān)系。以此為基礎(chǔ)，對(duì)其反應(yīng)速度、反應(yīng)級(jí)數(shù)、反應(yīng)原理進(jìn)行的測定。三是：定性與結(jié)構(gòu)分析方面。主要是因?yàn)樽贤饪梢姽夤舛扔?jì)還可以應(yīng)用到這些方面，比如，互動(dòng)異構(gòu)、幾何異構(gòu)現(xiàn)象推斷方面，具有很高的準(zhǔn)確率。

2 .波長示值誤差項(xiàng)目檢定中需注意的問題

波長示值誤差是一項(xiàng)重要指標(biāo)，規(guī)程中對(duì)該項(xiàng)指標(biāo)的檢測，給出了多種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行選擇。選擇哪一種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，要根據(jù)儀器的情況。一般zui常用的波長標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是氧化鈥玻璃濾光片、鐠釹玻璃濾光片。因其使用zui方便（不用打開儀器光源部分），汞燈等波長標(biāo)準(zhǔn)需放到光源部分，操作起來相對(duì)麻煩。但由于氧化鈥玻璃等濾光片需要通過高等級(jí)紫外可見分光光度計(jì)對(duì)參考波長定值后才可用于對(duì)相對(duì)等級(jí)較低的儀器進(jìn)行檢測，所以使用時(shí)需充分考慮定值時(shí)使用的紫外可見分光光度計(jì)的性能，尤其需要考慮到儀器的光譜帶寬，定值用儀器的光譜帶寬多設(shè)定為 2nm。但大多數(shù)儀器的光譜帶寬是固定的，而且較大，尤其是低檔儀器，如752型紫外可見分光光度計(jì)光譜帶寬為 4nm。同一臺(tái)紫外可見分光光度計(jì)在其他條件不變下，光譜帶寬分別設(shè)定為 0.5nm、2.0nm、5.0nm 時(shí)使用氧化鈥玻璃和鐠釹濾光片掃描得到的峰值數(shù)據(jù)，可見當(dāng)儀器的光譜帶寬發(fā)生變化時(shí)，使用氧化鈥玻璃或

鐠釹玻璃濾光片檢測得到的波長誤差存在著較大的差異，對(duì)于光譜帶寬較大的儀器甚至部分波峰檢測不到。而且對(duì)于具備自動(dòng)掃描功能的儀器，掃描速度同樣對(duì)檢測結(jié)果有著不可忽視的影響。

3 .紫外-可見分光光度計(jì)測量誤差超差的調(diào)修

3.1 波長示值誤差超差的調(diào)修

如果紫外-可見分光光度計(jì)的波長示值誤差超出規(guī)程規(guī)定的范圍必須進(jìn)行調(diào)修，調(diào)修后再次經(jīng)檢定合格后方能使用.

常見的波長示值誤差超差的情況可以分為兩種：線性誤差。線性誤差的特點(diǎn)是儀器三個(gè)波長段的波長誤差偏向同一方向且數(shù)值相近。調(diào)修方法為：首先將波長調(diào)節(jié)至580nm處，然后在樣品池光路中放置一張白紙查看單色光的顏色，若不是橙黃色需調(diào)節(jié)波長使白紙上的單色光成為橙黃色且邊緣清晰和無雜色。接著將波長刻度盤的螺母擰松并旋轉(zhuǎn)至 580nm.再使用濾光片或標(biāo)準(zhǔn)溶液檢定波長誤差，為了進(jìn)一步縮小波長誤差可再次擰松刻度盤螺母使刻度盤向相反方向旋轉(zhuǎn)相同

誤差的刻度，直至調(diào)節(jié)到合格范圍之內(nèi)。非線性誤差。非線性誤差的特點(diǎn)是儀器三個(gè)波段的波長誤差有正有負(fù)。調(diào)修時(shí)需首先將儀器中間波段的波長利用上述方法調(diào)為準(zhǔn)確，然后根據(jù)偏移情況進(jìn)行調(diào)節(jié)：對(duì)于低端為正差和為負(fù)差的現(xiàn)象可順時(shí)針調(diào)節(jié)準(zhǔn)直螺母；對(duì)于低端為負(fù)差和為正差的現(xiàn)象可逆時(shí)針調(diào)節(jié)準(zhǔn)直螺母。

3.2 基線平直度超差的調(diào)修

基線平直度超差的原因通常有：濾光片或其它光學(xué)元件被灰塵、水珠或者霉斑污染發(fā)生散射現(xiàn)象造成，對(duì)光學(xué)元件進(jìn)行清理后問題可以得到解決。濾光片安裝不牢固或者不正確，波長調(diào)整時(shí)易產(chǎn)生較大噪聲，應(yīng)對(duì)濾光片的安裝進(jìn)行檢查。鎢燈與氘燈切換時(shí)基線發(fā)生較大的跳動(dòng)說明光源的切換存在問題，應(yīng)檢查光源的切換是否存在問題。儀器使用時(shí)間太長光電轉(zhuǎn)換器和放大器易發(fā)生老化，更換后可以降低基線

平直度誤差。電壓不穩(wěn)或電磁干擾也會(huì)對(duì)基線平直度造成較

大的影響，電壓不穩(wěn)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)加裝穩(wěn)壓器。

在新時(shí)代下，很多新技術(shù)、新材料會(huì)逐漸應(yīng)用到紫外可見分光光度計(jì)，使其更加完善，擁有更多的性能，具有更好的應(yīng)用價(jià)值，在更多的領(lǐng)域中發(fā)揮自身的作用。從長遠(yuǎn)來說，它具有很好的發(fā)展前景，必定會(huì)走上可持續(xù)發(fā)展道路。